Độ phân giải của kính hiển vi là yếu tố quan trọng nhất quyết định chất lượng hình ảnh của kính (xem thêm kính hiển vi quang học). Có nhiều yếu tố khác nhau quyết định độ phân giải. Một số yếu tố phụ thuộc vào người sử dụng kính hiển vi và ngược lại, một số yếu tố là do bản thân kính hiển vi. Một số yếu tố đóng vai trò rất lớn và ngược lại, một số có vai trò rất nhỏ.
Các yếu tố liên quan đến vật kính:
Sửa sai thấu kính: thấu kính tiêu sắc phức hợp sẽ tập trung nhiều màu sắc quang phổ vào một điểm so với thấu kính tiêu sắc, do đó hình ảnh từ thấu kính này sẽ sắc nét hơn.
Số khẩu độ của vật kính: được in trên vật kính. Giá trị này càng cao, độ phân giải càng cao (xem thêm Vật kính).
Hệ thống chiếu sáng:
Màu sắc chung của ánh sáng: bước sóng ánh sáng càng ngắn, độ phân giải càng cao. Nếu kính hiển vi của bạn sử dụng đèn halogen hoặc tungsten thay vì đèn LED, màu sắc của ánh sáng sẽ chuyển dần về phía đỏ của quang phổ theo giời gian. Đây là nguyên nhân làm giảm độ phân giải. Màu sắc của ánh sáng cũng thay đổi theo cường độ. Nếu bạn chỉnh đèn tới cường độ tối đa, màu sắc ánh sáng sẽ chuyển về phía xanh của quang phổ, bước sóng ngắn và độ phân giải cao. Đèn LED không thay đổi màu sắc theo tuổi thọ và độ sáng.
Phổ ánh sáng (khoảng màu): khoảng màu cũng quyết định tới độ phân giải. Trong trường hợp ánh sáng đơn sắc, sẽ không bị ảnh hưởng bởi quang sai màu và ánh sáng có thể tập trung tại một điểm.
Các yếu tố liên quan đến mẫu
Độ dày thích hợp của lamen: độ dày này rất quan trọng với vật kính có số khẩu độ cao. Đối với nững vật kính khác thì ảnh hưởng này không đáng kể.
Chỉ số khúc xạ của lamen: bạn không phải quan tâm đến điều này vì đây là trách nhiệm của nhà sản xuất.
Chỉ số khúc xạ của môi trường chứa mẫu: giá trị này phải gần nhất với chỉ số khúc xạ thủy tinh nếu có thể.
Độ dày của môi trường chứa mẫu: càng mỏng càng tốt.
Dầu soi kính: vật kính có gắn nhãn OIL cần dầu soi kính hiển vi thích hợp để có độ phân giải tốt nhất.
Điều chỉnh kính hiển vi
Thiết lập màng chắn sáng tụ quang thích hợp: thiết lập phải phù hợp với số khẩu độ của kính hiển vi sử dụng.
Các bước để đạt chất lượng hình ảnh tốt nhất:
Sử dụng bóng đèn mới giúp giảm bước sóng ánh sáng. Có thể thay thế bằng cách sử dụng kính lọc màu xanh.
Sử dụng lamen có độ dày thích hợp và đảm bảo môi trường chứa mẫu có chỉ số khúc xạ gần với thủy tinh.
Điều chỉnh màng chắn sáng tụ quang theo số khẩu độ của vật kính.
Nếu bạn sử dụng dầu soi kính hiển vi cần đảm bảo dầu có chỉ số khúc xạ phù hợp.
Giữ kính hiển vi tránh bụi.
Đảm bảo vật kính, thị kính đều sạch.
